一、概述
結核-γ干擾素釋放試驗(TB-IGRA)原理如下:
特異性刺激抗原“esat6和cfp10”是致病性結核分枝桿菌特有而卡介苗、其它分枝桿菌沒(méi)有的獨特片段。
結核分枝桿菌感染者體內擁有針對每種抗原的特異性T淋巴細胞,能識別、遞呈這些抗原,并刺激T淋巴細胞增殖、釋放細胞因子,如IFN-γ。可通過(guò)ELISA方法定量檢測體外釋放的特異性IFN-γ,從而判斷是否感染結核分枝桿菌。
二、TB-IGRA過(guò)程
A、刺激過(guò)程示意圖:
B、檢測過(guò)程示意圖:
三、使用方法推薦(ELISA)
A、刺激原的量:1ug/管
B、ELISA試劑使用推薦:
C6H4:1:1000包被抗體過(guò)夜。洗板、封閉。加樣100ul,同時(shí)加入20ul 1:2000稀釋的8A11-F(ab)2-HRP,洗板、顯色、終止。
C、標準品定量范圍
以校準品吸光度均值為自變量(X),其對應的IFN-γ的含量(12.5 pg/ml~400 pg/ml)為因變量(Y),進(jìn)行乘冪擬合,求出線(xiàn)性回歸方程為y=167.64x0.9554,數據及示意圖如下:
校準品值 | 2.294 | 1.277 | 0.621 | 0.275 | 0.136 | 0.065 |
校準品IFN-γ含量 (單位:pg/ml) | 400 | 200 | 100 | 50 | 25 | 12.5 |
四、結果判定推薦
測試培養管(T)含量值=T、本底對照培養管(N)含量值=N、陽(yáng)性對照培養管(P)含量值=P(單位:pg/ml)
N | P-N | T-N | 結果判定 | 結果解釋 |
≤400 | 任何值 | ≥14 并且≥(N/4) | 陽(yáng)性 | 感染結核分枝桿菌 (結核活動(dòng)期感染、潛伏感染或隱性感染) |
≥20 | <14 | 陰性 | 未感染結核分枝桿菌 | |
≥20 | ≥14但<(N/4) | 陰性 | ||
<20 | <14 | 不確定 | 不能確定是否感染結核分枝桿菌 | |
<20 | ≥14但<(N/4) | 不確定 | ||
>400 | 任何值 | 任何值 | 不確定 |
五、性能評估
*參照澳大利亞QFT試劑
六、原料信息